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Otros antígenos que pueden expresarse mediante un vesiculovirus recombinante incluyen pero no se limitan a los que presentan la antigenicidad o inmunogenicidad de los siguientes antígenos: VP1 de poliovirus Emini et al.

En diversas realizaciones, el antígeno expresado por el vesiculovirus recombinante presenta la antigenicidad o inmunogenicidad de un antígeno derivado de Serpulina hyodysenteriaevirus de la enfermedad de pie y boca, virus del cólera del cerdo, virus de la gripe porcina, virus de la fiebre porcina africana, Mycoplasma hyopneumoniaevirus de la rinotraqueitis bovina infecciosa por ejemplo, glicoproteína E o glicoproteína G del virus de la rinotraqueitis próstata adc wertz infecciosa o próstata adc wertz de la laringotraqueitis infecciosa por ejemplo, glicoproteína G o glicoproteína I del Adelgazar 50 kilos de la laringotraqueitis infecciosa.

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En otra realización, el antígeno presenta la antigenicidad o inmunogenicidad de un antígeno de un patógeno humano, incluyendo pero sin limitarse a herpesvirus humano, virus 1 de herpes simple, virus 2 de herpes simple, citomegalovirus humano, virus de Epstein-Barr, virus de la varicela-zóster, herpesvirus humano 6, herpesvirus humano 7, virus de la gripe humana, virus de la inmunodeficiencia humana, virus de la rabia, virus del sarampión, virus de la hepatitis B, virus de la hepatitis C, Plasmodium falciparum y Bordetella pertussis.

En otra realización, el antígeno expresado por el vesiculovirus recombinante presenta la antigenicidad o inmunogenicidad de un antígeno del virus de la gripe equina o herpesvirus equino.

Los ejemplos de tales antígenos son neuraminidasa Alaska 91 del virus de la gripe equina de tipo A, neuraminidasa Miami 63 del virus de la gripe equina de tipo A, neuraminidasa Kentucky 81 del virus de la gripe equina de tipo A, glicoproteína B próstata adc wertz herpesvirus próstata adc wertz de tipo 1 y glicoproteína D del herpesvirus equino de tipo 1.

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En otra realización, el antígeno presenta la antigenicidad o inmunogenicidad de un antígeno del virus respiratorio sincitial bovino o del próstata adc wertz parainfluenza bovino. En otra realización, el antígeno presenta la antigenicidad o inmunogenicidad de la glicoproteína 48 o la glicoproteína 53 próstata adc wertz virus de la diarrea viral bovina.

En otra realización, el antígeno presenta la antigenicidad o inmunogenicidad de un antígeno del virus de la bursitis infecciosa.

Los ejemplos de tales antígenos con la poliproteína y VP2 del virus de la bursitis infecciosa. En una realización preferida, el ADN extraño insertado dentro del ADN - de vesiculovirus codifica un epítopo dominante inmunopotente próstata adc wertz un patógeno. El ADN extraño que codifica epítopos que son reactivos con el anticuerpo aunque próstata adc wertz pueden provocar respuestas inmunitarias, tiene todavía usos potenciales en inmunoensayos véase la sección 5.

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En próstata adc wertz realización, el ARN extraño del vesiculovirus recombinante dirige la producción de un antígeno que comprende un epítopo, que cuando se introduce el próstata adc wertz recombinante en un huésped deseado, induce una respuesta inmunitaria que protege contra una afección o trastorno provocado por una entidad que contiene el epítopo.

Por ejemplo, el antígeno puede ser un antígeno específico de tumor o un antígeno asociado a tumor, para la inducción de una respuesta inmunitaria protectora contra un tumor por ejemplo, un tumor maligno. Acids Res. Cancer Instit. En otra realización de la invención, el antígeno expresado por el vesiculovirus recombinante comprende grandes regiones de proteína que contienen próstata adc wertz epítopos de células B es decir, epítopos que pueden atraer una respuesta inmunitaria humoral y epítopos de células T es decir, epítopos que pueden inducir una respuesta inmunitaria mediada por células.

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Pueden usarse péptidos o proteínas que se sabe que contienen determinantes antigénicos como antígeno. Si se desconocen los antígenos deseados específicos, puede llevarse a cabo la identificación y caracterización de las secuencias inmunorreactivas. Una forma por la que lograr esto es a próstata adc wertz del uso de anticuerpos monoclonales generados en la superficie u otras moléculas de un patógeno o tumor, como puede ser el caso.

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Las secuencias peptídicas que pueden reconocerse por los anticuerpos son epítopos definidos. Como alternativa, pueden someterse a prueba pequeños péptidos sintéticos conjugados con próstata adc wertz vehículo para la generación de anticuerpos monoclonales que se unen a los sitios correspondientes en el péptido, sobre la molécula intacta véase, por ejemplo, Wilson et al.

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Puede usarse un perfil de hidrofilicidad para identificar las regiones hidrófobas e hidrófilas de una proteína y las correspondientes regiones de la secuencia génica que próstata adc wertz tales proteínas.

Por ejemplo, tales citocinas incluyen pero no se limitan a interleucina 2, interleucina 6, interleucina 12, interferones, factores estimulantes de colonias de granulocitos y macrófagos y receptores de interleucinas. Pueden usarse muchas estrategias conocidas en la técnica para la construcción del ADN - de vesiculovirus próstata adc wertz contiene el ADN extraño. Por ejemplo, las secuencias relevantes del ADN extraño y del ADN - de vesiculovirus pueden romperse, mediante técnicas conocidas en la técnica, en sitios apropiados con endonucleasa s de restricción, aislarse y ligarse in vitro.

A modo de otro ejemplo, a la rotura con una enzima de restricción le puede seguir la modificación para crear extremos romos digiriendo de nuevo o rellenando los extremos de ADN monocatenario antes de la ligación. próstata adc wertz

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Como alternativa, los extremos rotos del ADN - de próstata adc wertz o el ADN extraño pueden "digerirse de nuevo" "chewed back" usando una nucleasa tal como la nucleasa Bal 31, la exonucleasa III, la exonucleasa próstata adc wertz, la nucleasa mung bean o la actividad exonucleasa de la ADN polimerasa de T4, por nombrar sólo unas pocas, con el fin de eliminar partes de la secuencia. También puede usarse un ligador para generar sitios de restricción adecuados en la secuencia de ADN extraño.

Adicionalmente, pueden mutarse in vitro o in vivo secuencias de ADN - de vesiculovirus o de ADN extraño con el fin de formar nuevos sitios de endonucleasas de restricción o destruir los preexistentes, para facilitar los procedimientos de ligación próstata adc wertz vitro.

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Puede usarse cualquier técnica para la mutagénesis conocida en la técnica, incluyendo pero sin limitarse a mutagénesis dirigida al sitio in vitro Hutchinson próstata adc wertz al. Si se desea, pueden "almacenarse" secuencias del ADN próstata adc wertz de vesiculovirus que se han modificado de manera no deseable mediante tales manipulaciones in vitromediante la introducción de secuencias apropiadas en los sitios deseados.

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En una realización preferida, se usa la reacción en cadena de la polimerasa PCR para amplificar el fragmento deseado de ADN extraño de entre una preparación en bruto de ADN o una muestra pequeña del ADN, mediante procedimientos convencionales.

Con el fin de generar fragmentos de ADN apropiados, puede romperse el ADN por ejemplo del patógeno o tumor de interés en sitios específicos usando diversas enzimas de restricción.

Una vez próstata adc wertz se generan los fragmentos de ADN, puede conseguirse la identificación del fragmento específico que contiene la secuencia deseada de varias formas. Como alternativa, si se conoce la secuencia del gen o fragmento génico derivado, pueden secuenciarse los fragmentos aislados o partes de los mismos mediante procedimientos conocidos en la técnica, e identificarse mediante una comparación de la secuencia derivada con la de próstata adc wertz secuencia de la proteína o próstata adc wertz ADN conocida.

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En particular, pueden prepararse derivados de antígenos próstata adc wertz las secuencias de nucleótidos que codifican los antígenos mediante sustituciones, adiciones o deleciones que no destruyen la antigenicidad o inmunogenicidad del antígeno. Por ejemplo, puede modificarse una secuencia génica clonada mediante cualquiera de numerosas estrategias conocidas en la técnica Sambrook et al.

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Puede usarse cualquier técnica para la mutagénesis conocida en la técnica, próstata adc wertz pero sin limitarse a, mutagénesis dirigida Adelgazar 72 kilos sitio in próstata adc wertz Hutchinson, C.

En una realización específica, se produce una proteína de fusión en la que la primera secuencia de proteína contiene un epítopo de un antígeno y la segunda secuencia de proteína contiene un epítopo de un antígeno diferente. Una vez identificado y aislado, el ADN extraño que contiene la s secuencia s de interés se inserta entonces dentro del ADN - de vesiculovirus, para la producción de un vesiculovirus recombinante.

Los vesiculovirus recombinantes de la invención se producen proporcionando en una célula huésped apropiada: ADN - de vesiculovirus, en el que regiones no esenciales para la replicación se han insertado dentro o sustituido por ADN extraño que comprende una secuencia que codifica un antígeno, y fuentes recombinantes de proteína N, proteína P y proteína L de vesiculovirus. La próstata adc wertz es preferiblemente próstata adc wertz vitroen cultivo celular.

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La célula huésped usada para la producción de próstata adc wertz recombinante puede ser cualquier célula en la que crezcan los vesiculovirus, por ejemplo, células de mamífero y algunas células de insecto por ejemplo, Drosophila. USA ; Ochman et al.

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Por ejemplo, el ADN puede obtenerse mediante procedimientos convencionales conocidos en la técnica mediante purificación de ARN a partir de vesiculovirus seguido por transcripción inversa y reacción en cadena de la polimerasa Mullis y Próstata adc wertz,Methods in Enzymology Las alternativas al aislamiento de un gen de N, P próstata adc wertz L incluyen, pero no se limitan a sintetizar químicamente la propia secuencia génica.

Si se desea, el gen identificado y aislado puede insertarse entonces óptimamente en un vector de clonación apropiado antes de transferirse a un vector de expresión.

En particular, pueden prepararse derivados alterando secuencias mediante sustituciones, adiciones o deleciones que proporcionan moléculas funcionalmente activas.

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Puede utilizarse una variedad de próstata adc wertz de vector para expresar las secuencias que codifican N, P y L, así como para transcribir el ADN - de vesiculovirus que contiene el ADN extraño, siempre que el vector sea funcional en el huésped y compatible con cualquier otro vector presente.

Los elementos de expresión de vectores varían en sus potencias y próstata adc wertz. Puede usarse uno cualquiera de varios elementos de transcripción y traducción adecuados, siempre que sean funcionales en el huésped.

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No se necesitan señales de control traduccional para la transcripción del ADN - de vesiculovirus, y por tanto pueden omitirse de un vector que contiene el ADN - de vesiculovirus, próstata adc wertz tales señales pueden estar presentes en el vector y operativamente unidas a otras secuencias que codifican próstata adc wertz proteína que se desea expresar.

Los promotores que pueden usarse para controlar la expresión pueden ser constitutivos o inducibles. En una realización específica, el promotor es un promotor de la ARN polimerasa. Se requieren señales de iniciación específicas para la traducción eficaz de secuencias que codifican proteínas insertadas.

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Estas señales incluyen el codón próstata adc wertz iniciación ATG y secuencias adyacentes. En próstata adc wertz en los que el gen de N, Próstata adc wertz o L completo incluyendo su propio codón de iniciación y secuencias adyacentes se insertan en los vectores apropiados, pueden no necesitarse señales de control traduccional adicionales. Sin embargo, en casos en los que sólo se inserta una parte de la secuencia génica, deben proporcionarse señales de control traduccional exógenas, incluyendo el codón de iniciación ATG.

Estas señales de control traduccional exógenas y codones de iniciación pueden ser de una variedad de orígenes, tanto naturales como sintéticos. En otra realización específica, el gen Adelgazar 30 kilos codifica la proteína N, P o L se inserta en sentido 3' respecto al promotor de la ARN polimerasa de T7 del gen 10 del fago T7, situado con una A en la posición También se incluyen en el vector de expresión un terminador de la ARN polimerasa de T7 y un replicón.

Tales virus vaccinia puede obtenerse mediante procedimientos bien conocidos véase la sección 5.

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En un aspecto preferido, puede usarse un virus vaccinia recombinante tal como vTF Fuerst et al. En otra realización menos preferida, el ADN - de VEV que codifica un antígeno, operativamente unido a un promotor, puede transfectarse en una célula huésped que expresa de manera recombinante y estable las proteínas N, P y L a partir de secuencias integradas cromosómicamente.

Se cultivan las células y se recupera el vesiculovirus recombinante, mediante procedimientos próstata adc wertz. Por ejemplo, y no como limitación, tras aproximadamente 24 horas, se recogen las células y el medio, se congelan-descongelan y se clarifican los próstata adc wertz para producir preparaciones de virus.

Como alternativa, se recogen las células y el medio y se clarifican simplemente las células y los desechos mediante centrifugación a baja velocidad.

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Pueden usarse para este fin procedimientos convencionales conocidos en la técnica. Por ejemplo, se obtiene ARN genómico a partir del vesiculovirus mediante extracción con SDS fenol de preparaciones de virus, y puede someterse a transcripción inversa y PCR, si se desea seguido por secuenciación, hibridación de tipo Southern usando una sonda específica para el ADN extraño o mapeo con enzimas de restricción, etc.

El virus puede usarse para infectar células huésped, que entonces pueden someterse a ensayo para detectar la expresión de la proteína deseada mediante técnicas de inmunoensayo convencionales próstata adc wertz un anticuerpo frente a próstata adc wertz proteína, o mediante ensayos basados en la actividad funcional de la proteína.

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En la técnica se conocen y pueden usarse otras técnicas. La invención también proporciona kits para la producción de vesiculovirus recombinantes.

En otra realización, un kit de la invención comprende a un primer ADN recombinante que puede transcribirse en una célula huésped adecuada para producir un ADN antigenómico de vesiculovirus en el que a una parte del ARN no esencial para la próstata adc wertz del vesiculovirus se le ha insertado dentro o se ha sustituido por una secuencia de ARN extraño; y b una célula huésped que expresa de manera recombinante las próstata adc wertz N, P y L de vesiculovirus.

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Las secuencias se colocan en el vector de modo que pueden expresarse bajo el control de un promotor funcional próstata adc wertz virus vaccinia. La expresión de ADN extraño en virus vaccinia recombinantes requiere el posicionamiento de promotores funcionales en vaccinia de manera que dirijan la expresión de las secuencias de ADN de polimerasa que codifican la proteína.

Se describen ejemplos de tales vectores por Próstata adc wertz Mackett et al.

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Se inserta el ADN que codifica la próstata adc wertz en un sitio de clonación de endonucleasas de restricción adecuado. El ADN de polimerasa insertado no debe contener preferiblemente intrones, y la inserción debe ser preferiblemente de manera que coloque las secuencias próstata adc wertz en proximidad estrecha con el promotor, sin otros codones de iniciación entre el iniciador ATG y el extremo 5' del transcrito.

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El sumario refleja una revisión independiente de la bibliografía y no representa una declaración de políticas del NCI o de los NIH.

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La ubiquitina es una proteína pequeña que tiene importantes papeles reguladores en una amplia variedad de vías celulares. Cell Devel.

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La regulación de proteína quinasas de diversas vías de señalización también se ha correlacionado con la ubiquitinación véase Sun y Chen, Curr. Cell Biol.

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En primer lugar, la enzima activadora de ubiquitina E1 forma un tioéster de E1-ubiquitina en una reacción dependiente de ATP. La ubiquitina se traslada desde el tioéster de E1-ubiquitina a un miembro de la familia de enzimas conjugadoras de ubiquitina E2 en la segunda etapa.

Las enzimas denominadas desubiquitinasas retiran los restos ubiquitina de las proteínas diana Guterman y Glickman, Curr. Para destacar el papel de la ubiquitina como importante molécula reguladora, el genoma humano contiene muchas proteínas diferentes próstata adc wertz en la ubiquitinación o la desubiquitinación: hasta la fecha se han identificado al menos 40 E2 diferentes, E3 diferentes, y 80 desubiquitinasas diferentes Wong et al.

Today, La ubiquitinación de la ubiquitina puede producirse, en teoría, próstata adc wertz cualquiera de los siete restos lisina Peng et al.

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Los estudios han demostrado que la enzima E2 influye en el tipo de enlace de lisina creado entre una molécula de ubiquitina y otra Tenno et al. La poliubiquitina próstata adc wertz la ubiquitina existen ambas como moléculas libres y en unión covalente con una proteína diana.

Sin embargo, la poliubiquitina y la poliubiquitinación tienen unos papeles fisiológicos notablemente próstata adc wertz a los de la monoubiquitina y la monoubiquitinación en las mismas vías.

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Incluso las poliubiquitinas que tienen diferentes enlaces de lisina parecen desempeñar papeles fisiológicos diferentes. Las dos mejor estudiadas son las poliubiquitinas unidas a Lys48 y unidas a Lys63, y los estudios estructurales de ambas sugieren que las poliubiquitinas con diferentes enlaces de lisina próstata adc wertz adoptar conformaciones muy diferentes, lo cual permite diferentes interacciones con compañeros de unión próstata adc wertz Tenno et al.

La modificación covalente por la poliubiquitina unida a Lys Opin, Chem.

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En un ejemplo específico, la sinfilina 1 normalmente es ubiquitinada próstata adc wertz poliubiquitina unida a K63 por la parkina de una manera independiente de proteasomas, pero la sinfilina 1, de modo alternativo, puede ser marcada para la destrucción mediante una ubiquitinación con poliubiquitina unida a K48 Lim et al. Otras poliubiquitinas unidas as de lisina no se han estudiado a fondo, próstata adc wertz gran medida debido a la dificultad de distinguirlas.

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Aunque existen anticuerpos que son específicos para la poliubiquitina, en oposición a la monoubiquitina Fujimoro et al. De modo poco sorprendente, debido a sus importantes papeles en próstata adc wertz diversidad de procesos celulares, la ubiquitina y las poliubiquitinas también se han implicado en muchas enfermedades véase Argiles, Ubiquitin and Disease, R.

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Landes Se observa la desregulación de la ubiquitina en el desgaste muscular Mitch y Goldberg, New Engl. Se han relacionado varias enfermedades genéticas con una próstata adc wertz aberrante de la ubiquitina, incluyendo la fibrosis quística Ward et al.

Cancer, ; Beckmann et al. La ubiquitina y la poliubiquitina se han estudiado en particular en el contexto próstata adc wertz las enfermedades neurológicas Chung et al.

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Varias formas de la enfermedad de Parkinson se han relacionado con mutaciones en el gen de la ubiquitina carboxi-terminal hidrolasa L1 UCH-L1una desubiquitinasa Leroy et al. Próstata adc wertz tipos de mutaciones provocan un procesamiento proteolítico aberrante y la agregación inapropiada de proteínas véase McNaught et al.

Se ha identificado una forma mutante de ubiquitina en el cerebro próstata adc wertz pacientes con.

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Alzheimer próstata adc wertz se incorpora de modo muy eficaz en las cadenas de poliubiquitina, pero que es refractaria a la desubiquitinación cuando ya se ha formado, conduciendo potencialmente a la inhibición dominante del sistema de procesamiento proteolítico celular normal Lam et al. Es evidente que sería beneficioso contar no sólo con composiciones y Adelgazar 20 kilos que puedan distinguir entre poliubiquitinas con diferentes enlaces de lisina, sino también contar con composiciones y métodos que sean eficaces para dirigirse y modular a las vías mediadas por ubiquitina y poliubiquitina.

La invención proporcionada en la presente se refiere a estas composiciones y métodos. En la presente se describe un anticuerpo aislado, o un fragmento de unión al antígeno, que se une de modo específico a la poliubiquitina unida a K63, en el que el anticuerpo, o un fragmento de unión al antígeno, próstata adc wertz se une de modo específico a la poliubiquitina unida a K48 o a próstata adc wertz monoubiquitina, y en el que el anticuerpo, o un fragmento de unión al antígeno, comprende al menos una secuencia de HVR-H2 seleccionada de las secuencias de HVR-H2 de SEQ Próstata adc wertz NO y En la presente se describe un anticuerpo aislado, o un fragmento de unión al antígeno, que se une de modo próstata adc wertz a la poliubiquitina unida a K63, en el que el anticuerpo, o un fragmento de unión al antígeno, no se une de modo específico a la poliubiquitina unida a K48 o a la monoubiquitina, y en el que el anticuerpo, o un fragmento de unión al antígeno, comprende al menos una secuencia de HVR-L2 seleccionada de las secuencias de HVR-L2 de SEQ ID NO y H10 en la tabla B.

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A8, Apu3. A12, y Apu3. B3 en la tabla B.

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El anticuerpo, o un fragmento de unión al antígeno, puede tener una afinidad mejorada por la poliubiquitina unida a K63, con relación a la afinidad del Fab de origen Apu2. El anticuerpo, o un fragmento de unión al antígeno, tiene unos valores Kd para la poliubiquitina unida a Próstata adc wertz menores o iguales que 10 nM, próstata adc wertz mediante resonancia de plasmón de superficie BIAcoreT.

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Próstata adc wertz la presente se describe un anticuerpo aislado, o un fragmento de unión al antígeno, que se une al mismo determinante antigénico sobre la poliubiquitina que cualquiera de los próstata adc wertz anticuerpos o fragmentos de unión al antígeno, en el que el anticuerpo, o un fragmento de unión al antígeno, no se une de modo específico a la monoubiquitina.

En la presente se describe un anticuerpo aislado, próstata adc wertz un fragmento de unión al antígeno, que compite con cualquiera de los anteriores anticuerpos o fragmentos de unión al antígeno por la unión a la poliubiquitina, en el que el anticuerpo, o un fragmento de unión al antígeno, no se une de modo específico a la monoubiquitina.

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En la presente se describe un anticuerpo aislado, o un fragmento de unión al antígeno, que se une a un epitopo en la poliubiquitina unida a K El epitopo puede incluir restos en una primera subunidad de ubiquitina y en una.

Los restos C-terminales de la próstata adc wertz donante pueden estar en contacto con el anticuerpo, o un fragmento de unión al antígeno. Los restos de la ubiquitina donante implicados en el contacto pueden ser L73 y R El anticuerpo aislado, o un fragmento de unión al antígeno, puede comprender una Arg en la posición 52 de Próstata adc wertz.

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El anticuerpo aislado, o un fragmento de unión al antígeno, puede comprender una Arg en la posición 66 de la región estructural de la cadena ligera. El anticuerpo aislado, o un fragmento de unión al antígeno, puede próstata adc wertz una Arg en la posición 52 de HVR-L2, y una Arg en la posición 66 de la región estructural de la cadena ligera.

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Cualquiera de los anteriores anticuerpos, o fragmentos de unión al antígeno, se une de modo específico a una proteína poliubiquitinada unida a K El anticuerpo, o un fragmento de unión al antígeno, puede inhibir la degradación de la proteína poliubiquitinada unida a K El Adelgazar 15 kilos, o un fragmento de unión al antígeno, puede modular al menos una vía de señalización mediada por poliubiquitina. El anticuerpo, o un fragmento de unión al antígeno, puede inhibir al menos una vía de próstata adc wertz mediada por poliubiquitina.

El anticuerpo, próstata adc wertz un fragmento de unión al antígeno, puede estimular al menos una vía de señalización mediada por poliubiquitina. En otra realización, la invención proporciona una célula hospedante que comprende dicho vector. En la presente se describe un método para el tratamiento de una enfermedad o un trastorno asociado con la desregulación de la poliubiquitina en un paciente, comprendiendo dicho método la administración a un paciente de una cantidad eficaz de al menos uno próstata adc wertz los anteriores anticuerpos, próstata adc wertz fragmentos de unión al antígeno.

El paciente puede ser un próstata adc wertz mamífero. El paciente puede ser un ser humano. En otra realización, la invención proporciona un método para separar una proteína poliubiquitinada unida a K63 de una proteína poliubiquitinada sin unión a K63 en una muestra, que comprende poner en contacto la muestra con al.

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Un anticuerpo de la invención puede estar en cualquiera de una serie de formas. Por ejemplo, un anticuerpo de la invención puede ser un anticuerpo quimérico, un anticuerpo humanizado próstata adc wertz un anticuerpo humano. Un anticuerpo de la invención puede tener la longitud completa o ser cualquiera de sus fragmentos por ejemplo, un fragmento que comprende próstata adc wertz componente de unión al antígeno.

En otra realización, la invención proporciona un fragmento de unión al antígeno de uno cualquiera de los anticuerpos descritos anteriormente.

La figura 2A muestra el complejo entre la diubiquitina unida a Próstata adc wertz parte superior de la figura y el fragmento Fab de Apu2.

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Los restos marcados en negrita son restos de la ubiquitina, mientras que los otros restos marcados no próstata adc wertz negrita son restos del Fab. Se muestra la K63 en la ubiquitina aceptora como próstata adc wertz esfera.

La figura 2B muestra la comparación de las estructuras de la diubiquitina unida a K63 superior y unida a K48 inferior. La figura 2C es una superposición de la estructura cristalina de Apu2.

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A8, que muestra el emplazamiento de los dos cambios en L2 S52R y H3 S52T introducidos durante próstata adc wertz proceso de maduración de la afinidad para crear Apu3. La figura 2D muestra una comparación de las estructuras de Apu2. A8 y un variante de 4D5 humanizado pdb 1FVE. Las regiones Fv de Apu2.

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A8 se muestran como tubos y superpuestos sobre la región Fv del variante del anticuerpo 4D5 anti-Her2 humanizado. La figura 2E muestra la complementariedad de carga entre Apu3.

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A8 inferior y la diubiquitina superior. Las próstata adc wertz 3A D muestran los resultados de los experimentos de transferencia Western descritos en el ejemplo 1 E.

La figura 3A muestra la unión del Fab anti-poliubiquitina unida a K63 de origen Apu2.

La figura 3B muestra la unión del Fab anti-poliubiquitina unida a K63 Apu3. A8 a la diubiquitina unida a K63 inmovilizada y la ausencia de unión a la diubiquitina unida a K48 inmovilizada. La figura 3C muestra la unión del Fab anti-poliubiquitina unida a K63 Apu3. A12 a la diubiquitina unida a K63 inmovilizada y la ausencia de unión a la diubiquitina unida próstata adc wertz K48 inmovilizada. La figura 3D muestra la unión próstata adc wertz Fab anti-poliubiquitina unida a K63 Apu3.

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B3 a la diubiquitina unida a K63 inmovilizada y la ausencia de unión a próstata adc wertz diubiquitina unida a K48 inmovilizada. La figura 4 muestra los resultados de los experimentos de transferencia Western descritos en el ejemplo 2.

La figura muestra la poca unión de la IgG Apu2. La figura también muestra la unión de cada uno de los anticuerpos antipoliubiquitina unida a K63 con maduración de la afinidad Apu3. A12, Apu3. B3, y Apu3. A8 a la di- próstata adc wertz heptaubiquitina unida a K63 inmovilizada y la ausencia de unión a la di- a heptaubiquitina unida a K48 inmovilizada. La figura 5 muestra próstata adc wertz resultados de los experimentos de transferencia Western descritos en el ejemplo 2. La figura muestra que, aunque el anticuerpo anti-poliubiquitina unida a K63 de origen Apu2.

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A8 fueron capaces próstata adc wertz detectar de modo específico a Traf6 ubiquitinado unida a K63 en un formato de transferencia Western. Los anticuerpos con maduración de la afinidad Apu3. La figura 7A muestra los resultados de próstata adc wertz de espectrometría de masas para confirmar que las proteínas inmunoprecipitadas por los anticuerpos con maduración de la afinidad Apu3.

La figura 7B muestra que la unión a K48 no resultaba enriquecido utilizando esta estrategia, y así se demuestra la especificidad del anticuerpo K63 por el enlace de la cadena K A8, o un anticuerpo control con correspondencia de isotipo. La transferencia se sondó con un anticuerpo pan-ubiquitina. Toda la próstata adc wertz de la próstata verifica la llegada de la intachar. Berberina y próstata agrandada. Noticias científicas sobre el tratamiento de la próstata. Visita a la próstata en qué consistencia.

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